荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer; FRET),理学-力学-交叉力学-生物力学-细胞分子力学,当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠,并且两个分子的距离在10纳米范围以内时,发生的一种非放射性的能量转移现象。荧光能量共振转移(FRET)使得供体的荧光强度比它单独存在时要低得多(荧光猝灭),而受体发射的荧光却大大增强(敏化荧光)。在生命科学领域,FRET技术是检测活细胞中生物大分子纳米尺度距离变化的有力工具,在生物大分子相互作用分析、细胞生理研究、免疫分析等方面也有着广泛的应用。青色荧光蛋白(CFP)、黄色荧光蛋白(YFP)为目前应用最广泛的FRET检测荧光蛋白对。CFP的发射光谱与YFP的吸收光谱相重叠(图a)。将供体蛋白CFP(CFP ex)和受体蛋白YFP(YFP em)分别与两种目的蛋白融合表达。当两个荧光蛋白之间的距离在10纳米内,则供体CFP发出的荧光可被YFP吸收,并激发YFP发出黄色荧光(图b),此时通过测量CFP荧光强度的损失量来确定这两个蛋白是否相互作用。