光交联探针

光交联探针（photoaffinity probe），理学-化学-化学生物学-合成化学生物学-探针-光交联探针，一类携带光敏性基团的分子。能够在紫外光照射下产生活性中间体并与目标蛋白共价交联形成稳定的复合物，用于后续的分析鉴定。光交联技术于1964年由A.辛格和F.H.韦斯特海默[注]等首次提出。已经成为一种工具方法被广泛应用于化学生物学、药物化学、结构生物学等领域。光交联探针主要由三部分构成：活性基团、光交联基团和报告基团（图1）。活性基团具有生物活性，能够特异性识别并结合目标蛋白，常见的活性基团包括药物分子的药效团部分、酶的底物等；光交联基团能够在紫外光照射下共价标记目标蛋白，常见的光交联基团包括双吖丙啶（diazirine）、二苯甲酮（benzophenone）、芳基叠氮（arylazide）和二芳基四氮唑（diaryltetrazole）等。其光交联的机理是双吖丙啶、二苯甲酮、芳基叠氮在紫外光激发下产生碳卡宾或者氮卡宾，后者能够与蛋白中的N-H或者C-H键反应形成共价键，类似地，二芳基四氮唑能够在紫外光激发下生成氰亚胺，然后与氨基酸残基发生亲核加成形成共价键（图2）。