滚环放大技术

滚环放大技术（rolling circle amplification; RCA），理学-化学-分析化学-生命分析化学-DNA甲基化分析，恒温核酸扩增方法。以环状DNA为模板，通过一个短的DNA引物（与部分环状模板互补），通过DNA聚合酶使引物沿着环形模板进行复制，将dNTPs转变成单链DNA，此单链DNA包含成百上千个重复的模板互补片段。滚环放大是一种等温信号扩增方法，既可以进行靶基因的扩增又可以用于信号放大扩增，其线形扩增能力为105倍，指数化扩增能力大于109倍。这种方法不仅可以直接扩增DNA和RNA，还可以实现对靶核酸的信号放大，灵敏度达到一个拷贝的核酸分子，因此在核酸检测中具有很大的应用价值和潜力。滚环放大技术是借鉴病原生物体的滚环复制方式而提出的，它是一种多引物的指数的体外核酸扩增技术。滚环放大不但可以直接扩增特定的DNA、RNA分子，还能将这些靶核酸的信号放大；不仅可以直接扩增环形单链模板，然后检测扩增信号，也可以将单链模板经连接酶连接成环后进行扩增；不仅可以在均相中进行扩增，也可以在玻片、微阵列等界面上进行扩增。其灵敏度能达到一个拷贝的核酸分子。