定位诱变(site directed mutagenesis),理学-生物学-微生物学-微生物遗传学,利用各种方法使DNA分子内的特定位点发生突变,包括删除、插入和置换特定的碱基序列,从而得到含变异序列的突变基因的技术。利用这项技术一方面可对某些天然蛋白质进行定位改造,获得具有新功能、新特性的蛋白质,另一方面可为设计制作新型的突变蛋白提供理论依据。早期改变DNA的方法是通过一种称之为诱发突变的方法实现的,该方法是随机的、非定位的,但由于其简便实用,在某些领域仍有一席之地。随着现代分子生物学技术(包括DNA测序及合成、PCR技术等)的建立和发展,特别是基因组学及其测序技术的迅猛发展,使得人们对DNA的操作进入了一个新水平。PCR技术是进行定位诱变的重要手段。任何基因,只要知道两端及需要变异部位的序列,就可用PCR诱变去改造该基因的序列。由于方法简便易行、结果准确、高效,因此它已成为最常用的定位诱变方法。PCR诱变有两种方法:①变异部位位于基因的末端。只要5′端或3′端引物含有变异碱基,便可使PCR产物(目的基因)的两端引入各种变异。