交错延伸体外重组法

交错延伸体外重组法（staggered extention process in vitro recombination），理学-生物学-生物工程-酶工程-酶工程-酶分子改造-酶定向进化，在聚合酶链反应（PCR）中将退火-延伸合并为一个步骤并极大地缩短时间，使得引物在不同模板之间频繁退火直至得到全长基因的体外突变重组方法。由于PCR过程中模板不断转换，因此大多数新合成的DNA分子包含大量的突变组合，同时也会引入少量新突变。自20世纪90年代初DNA改组技术问世以来，体外突变重组技术得到迅猛发展。1998年，美国生物化学家F.H.阿诺德[注]同时提出了两种体外突变重组方法，即随机引动重组法和交错延伸重组法。交错延伸法的基本原理是：把常规的退火和延伸合并为一，并极大缩短退火-延伸时间，从而使每个PCR循环只能延伸一小段序列；经过重复的变性、退火-延伸过程，DNA片段随机的在不同模板之间退火-延伸，直至形成不同重组类型的杂合基因（见图）。