半合成法（semi-synthesis），医学-现代医学-药学领域-药物化学-核酸药物化学-核酸类药物的提取-半合成法，微生物发酵和化学合成方法联合使用的方法。又称酶-化学合成法。由于发酵方法生产核苷的产率很高，可从微生物发酵生产的核苷出发，再经磷酸酯化制备核苷和核苷酸类药物。常用的核苷磷酸化试剂有磷酸的活性衍生物，如一氯或二氯的衍生物；焦磷酸的活性衍生物，如焦磷酰氯、双-对硝基苯焦磷酸等，工业上广泛采用的是三氯氧磷。在5'-位羟基上引入磷酸基时，核苷上核糖的2'、3'位的羟基会产生干扰，所以磷酸化前需要对核糖的2'、3'位的羟基进行保护，常用的保护基有乙酰基、苄基、异亚丙基或苯甲酰基等，待磷酸化反应后再进行脱保护。由于采用了保护、去保护的方式，使得反应总产率有所下降。为了避免上保护、脱保护等工艺路线造成产率的下降，工业上采用五氧化二磷或三氯氧磷为磷酸化试剂。此方法不需要对核苷上核糖的2'、3'位羟基进行保护，仅在少量水的催化条件下，核苷可直接与磷酸化试剂反应生成相应的5'-核苷酸。以三氯氧磷为例，其可使肌苷、鸟苷、腺苷和尿苷5’位磷酸化，相应的5'-核苷酸产率高达88%～91%。