六角定赖（1495年－1552年1月21日），六角高赖次子，日本战国时代近江国守护大名，官至从四位下弹正忠，谥号江云，法名云光寺殿光室亀公大居士。永正十七年（1520年）10月六角高赖病故，次子六角定赖继承家督之位，当时京都政局极度混乱，控制了近江北部的浅井亮政也想染指南部，定赖就任近江守护后对两方的情况都十分关注，京都方面足利义材（义稙）一系的足利义晴被拥立后，与义晴对立的三好长庆退入近江，定赖算得上是一代英主，他审时度势遂与摄津细川晴元联盟协助义晴与三好氏作战，巧妙的打破了自己与三好氏和浅井氏两面对敌的状况，可以专心进行近江攻略。义晴病逝后定赖支援足利义辉，在中央幕府政权的行政之中，影响力占统治性的地位，保卫了京都的安定。与此同时，六角定赖开始频频发动对浅井氏的攻势，大永五年（1525年）包围小谷城大破浅井亮政，亮政被迫逃往美浓；享禄四年（1531年）、天文七年（1538年），又于琵琶湖北岸击破浅井军势，亮政不得不暂时降伏，成为其附属大名，六角家一时名震天下。